發(fā)布時(shí)間:2013-06-13 15:42:51
從自然界中得到的微生物菌種往往產(chǎn)值不高，達(dá)不到出產(chǎn)需求。因而，大家在知道和知道微生物特性的基礎(chǔ)上，應(yīng)用微生物遺傳變異及代謝調(diào)控理論，經(jīng)過(guò)操控微生物的成長(zhǎng)代謝條件，格外是以物理或化學(xué)要素誘發(fā)微生物驟變而發(fā)生優(yōu)秀性狀，迸一步挑選出高產(chǎn)菌株。
分子生物學(xué)的開(kāi)展、基因工程技能的應(yīng)用，為發(fā)酵工業(yè)供給了更為較好的育種手法。由此不只可以定向地進(jìn)步發(fā)酵產(chǎn)率，而且還可得到新的工程菌株，出產(chǎn)微生物不能發(fā)生的各種蛋門(mén)質(zhì)和肽類(lèi)，如胰島素、攪擾紊等。
發(fā)酵下業(yè)運(yùn)用的微生物菌種，開(kāi)始都是從自然界中別離挑選出來(lái)的。要從自然界找到咱們所需求的優(yōu)秀菌種，首要有必要把它們從許多的雜菌中別離出來(lái)，然后依據(jù)出產(chǎn)需求和菌種特性，選用各種不一樣的挑選辦法，選出功能杰出的純種。別離與挑選菌種的具體做法通常分為4個(gè)步驟，即樣品收集、增殖培育、純種別離和出產(chǎn)功能測(cè)定。
在自然界取得的樣品，是許多品種微生物的混雜物，通常選用平板劃線(xiàn)或平板稀釋法進(jìn)行純種別離。為了添加別離成功率，可經(jīng)過(guò)富集培育添加待別離菌的數(shù)最。即是運(yùn)用不一樣品種的微生物其成長(zhǎng)繁衍對(duì)環(huán)境和養(yǎng)分需求的不一樣，如溫度、pH、滲透壓、氧氣、碳源、氮源等，人為操控這些條件，使之利于某類(lèi)或某種微生物成長(zhǎng)，而不利于其他品種微生物的生計(jì)，以到達(dá)使意圖菌種占優(yōu)勢(shì)，而得以疾速別離純化的意圖。這種辦法又被稱(chēng)為施加選擇性壓力別離法。
操控培育時(shí)的氧氣，可將好氧和厭氧微生物分隔；在高溫下培育，可將嗜熱微生物和非嗜熱微生物分隔；操控不一樣的pH條件，可別離出嗜酸或嗜堿微生物；運(yùn)用高糖或高鹽的培育基進(jìn)行培育，可取得耐高滲透壓的微生物；控翩培育基的各種養(yǎng)分成分，均可使能運(yùn)用此種養(yǎng)分的微生物被富集，然后很多取得。
在別離培育基中也廣泛選用參加不一樣的抗生素或試劑來(lái)添加選擇性。如在別離放線(xiàn)菌和細(xì)菌時(shí)，可參加抗真菌抗生素；別離真菌時(shí)，可參加抗細(xì)菌抗生素。培育辦法可選用分批式富集培育（搖瓶培育）和恒化式富集培育（接連培育）兩種辦法。
分批式富集培育是指將富集培育物轉(zhuǎn)接到新的同一種培育基中，從頭樹(shù)立選擇性壓力，如此重復(fù)轉(zhuǎn)種幾回后，再取此富集培育物接種到固體培育基上，以取得單菌落。這種分批式富集培育中，轉(zhuǎn)種的時(shí)刻是要害應(yīng)在所需菌種占優(yōu)勢(shì)情況下轉(zhuǎn)種。
恒化式富集培育技能是經(jīng)過(guò)改動(dòng)限制性基質(zhì)的濃度，來(lái)操控兩類(lèi)不一樣菌株的比成長(zhǎng)速率。因而可經(jīng)過(guò)改動(dòng)稀釋速率進(jìn)行接連富集培育，取得所需求的菌種。用接連富集培育技能別離出來(lái)的菌種，格外合適用于接連發(fā)酵出產(chǎn)，而分批式富集培育鈍化辦法別離得到的菌株，在接連發(fā)酵出產(chǎn)中的體現(xiàn)很差。
接連富集培育辦法還可以用于別離習(xí)慣某種工業(yè)出產(chǎn)需求特性的菌株，如能習(xí)慣簡(jiǎn)略培育基的菌種，這樣不只可以下降出產(chǎn)成本，且不易染菌。還可進(jìn)步別離溫度，有可以別離出耐高溫菌株，在出產(chǎn)中節(jié)省冷卻水。用接連富集培育辦法也可挑選出能共生的安穩(wěn)混合菌群。
固體培育基常用于別離各種酶發(fā)生菌，在固體選擇性培育基中參加酶效果的底物培育微生物，可以運(yùn)用此底物的酶發(fā)生菌得以成長(zhǎng)，而且往往會(huì)在其菌落周?chē)鷺?gòu)成一通明圈。通明圈的巨細(xì)雖不能與酶生機(jī)的凹凸成正比，但可以作為菌種初篩的判別規(guī)范。像蛋白酶、脂肪酶、果膠酶、甘露聚糖酶、淀粉酶、纖維素酶等酶發(fā)生菌，都可用這個(gè)辦法進(jìn)行挑選。
本文參考《發(fā)酵工程原理與技術(shù)》一書(shū)。
常見(jiàn)問(wèn)題
