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纖維素酶發(fā)酵消泡劑的糖化處理

發(fā)布時間:2012-07-04 11:56:25

1.纖維素酶:產(chǎn)纖維素酶的微生物相當廣泛,細菌、放線菌、霉菌及擔子菌類都能產(chǎn)生纖維素酶。但能產(chǎn)生胞外纖維素酶系的種類則主要局限于木霉屬,漆斑菌屬,青霉屬等少數(shù)絲狀真菌。不管是普通的纖維素酶還是胞外纖維素酶,在生產(chǎn)的過程都需要用到纖維素酶發(fā)酵消泡劑,進行纖維素酶的產(chǎn)生。由于纖維素酶是一種多酶體系,在經(jīng)過纖維素酶發(fā)酵消泡劑的處理后,目前已發(fā)現(xiàn)有三種即C1酶,Cx酶及β一糖苷酶。C1酶是從纖維素長鏈非還原性末端,以纖維二糖為單位,切割β-1,4-糖苷鍵的外切酶。Cx酶是切斷纖維素長鏈內的任意糖苷鍵的內切酶。Cx酶的作用可為C1酶提供更多的非還原性末端。C1酶和C×酶單獨使用時活性較低,兩者混合后活性則提高很多。β-糖苷酶將纖維二糖水解成葡萄糖,可解除纖維二糖對C1酶和Cx酶的抑制作用。因此,在纖維素的糖化過程中,β-糖苷酶的不足,往往成為糖化反應的限速因子。 2. 纖維素酶糖化存在的問題:用纖維素酶糖化纖維素的最大缺點是糖化速度慢。其原因有四方面:①基質纖維素結構的難分解性;②酶活性低。尤其是β-糖苷酶活性太低。③纖維素糖化過程中的生成物纖維素二糖及葡萄糖分別抑制C1,C1酶及β-糖苷酶。由于β-糖苷酶活性低,使纖維二糖積累,更加深抑制C1酶、Cx酶;④木糖的積累,木糖由半纖維素水解產(chǎn)生(由于預處理未能除去半纖維素),當反應液中的木糖濃度達到5%時,木糖對纖維素酶的抑制率可達到10%。使用纖維素酶發(fā)酵消泡劑時解決上面出現(xiàn)的四個原因的有效方法,特別是第三種和第四種原因。 為了減少纖維二糖、葡萄糖、木糖等的抑制作用,研究者們提出兩個解決方案:一是開發(fā)管式連續(xù)糖化反應器和多段式酶糖化反應器,用此反應器并配合使用纖維素酶發(fā)酵消泡劑進行間歇式反應,投料濃度可達15%,糖化率達85%,時間是24 h;二是設法移去葡萄糖,在酒精發(fā)酵中可采用糖化發(fā)酵同時式(簡稱SSF)工藝,例如,在酶法糖化的同時,接入能利用木糖的菌株與釀酒酵母,降低木糖和葡萄糖濃度,減少對纖維素酶的抑制作用,從而提高糖化效率。但可能出現(xiàn)另一個問題,是酶和酵母所需溫度的不一致性,要解決這一矛盾就要篩選出耐高溫的產(chǎn)酒精酵母。 3. 纖維素的酸糖化工藝,在過去一直使用,酸法有濃酸和稀酸水解法兩種。 a.濃酸水解法:效果好,但要消耗大量硫酸。有的用少量濃硫酸與干燥的植物原料以及纖維素酶發(fā)酵消泡劑進行混合碾磨,最后將粘料加水稀釋并煮沸即可得到糖液。用這個方法對每100 kg的干木材,硫酸的消耗量可降到30 kg (85%H2S04)。但由于初期生成的葡萄糖,長期與強酸接觸,就會分解為乙酰丙酸、蟻酸等,使葡萄糖產(chǎn)率下降。 b.稀酸水解法:原料和酸的接觸面積越大,則水解效果越好,因此,原料適當粉碎是必要的。 本文參考《發(fā)酵微生物學》一書。
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