發(fā)布時間:2012-08-14 15:29:53
生物素與細胞膜透性的關系:這是生物素最為重要更為本質的影響。
在黃色短桿菌中,谷氨酸與天門冬氨酸生物合成的調節(jié)機制。谷氨酸比天門冬氨酸優(yōu)先合成,谷氨酸合成過剩時,就會反饋控制谷氨酸脫氫酶(GDH)與谷氨酸發(fā)酵消泡劑,使從草酰乙酸開始的生物合成轉向天門冬氨酸。當天門冬氨酸的生物合成過量時,就會反饋控制為磷酸烯醇丙酮酸羧化酶(PC酶)所催化的反應,停止草酰乙酸的生成。
所以,在正常情況下,谷氨酸并不積累。假如能設法改變細胞膜的滲透性,使細胞膜轉變成有力谷氨酸滲透的樣式,終產(chǎn)物谷氨酸不斷地排出于細胞外,這樣通過不斷除去終產(chǎn)物的方法,使細胞內的谷氨酸與谷氨酸發(fā)酵消泡劑不能積累到引起反饋調節(jié)的濃度,谷氨酸就會在細胞內繼續(xù)不斷地被優(yōu)先合成。當前谷氨酸生產(chǎn)菌就是通過生物素的限量等手段,影響細菌細胞膜或細胞壁的生物合成,改變細胞膜滲透性,使終產(chǎn)物谷氨酸不斷地透過細胞膜,分泌于發(fā)酵培養(yǎng)基中,就能積累谷氨酸。
生物素是怎樣影響細胞膜的,我們可以通過系列的實驗找到答案。
(1) 當谷氨酸產(chǎn)生菌在生物素貧乏(限量)和生物素豐富的培養(yǎng)基中生長時,產(chǎn)生的氨基酸含量差異較大。
在生物素貧乏條件下,排出的谷氨酸量是生物素豐富條件下的170倍以上,且谷氨酸占總氨基酸量的92%。
另一個關于培養(yǎng)基中生物素含量、谷氨酸產(chǎn)量的關系表明谷氨酸生產(chǎn)菌不能沒有生物素(即生物素缺乏),也不能在10μg/L濃度(即生物素豐富)的培養(yǎng)基中得到高的谷氨酸產(chǎn)量,只有在0.5-5μg/L濃度的培養(yǎng)基中(即生物素亞適量),才能獲得高產(chǎn)。當然適量的范圍在不同菌株中會有差別。在不同的碳源中也有所不同(如醋酸發(fā)酵谷氨酸時,亞適量只有糖質原料的1/10)。
(2) 在生物素含量不同的培養(yǎng)基中生長的菌細胞,經(jīng)過陽離子表面活性劑浸洗后,可以發(fā)現(xiàn)被洗去的氨基酸量有很大的不同。
這說明谷氨酸生產(chǎn)菌在正常代謝時(生物素豐富),保持一定的細胞結構,細胞膜緊密,谷氨酸保留體內,基本上不被浸洗。而在生物素貧乏的情況下,細胞膜的透性很大,浸洗非常容易。
(3) 生物素含量的不同,引起細胞膜的變化。細菌細胞內的脂肪酸幾乎都分布在細胞膜處,特別是細胞膜中的磷部分。生物素與谷氨酸發(fā)酵消泡劑貧乏時,菌體合成的脂肪酸減少,其中不飽和脂肪酸減少更多。磷脂中飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的比例是一定的,由于比例失調,磷脂的形成隨著降低,細胞膜的組成不健全,留有很多空洞,因而細胞的滲透性加大,對谷氨酸的控制作用也隨之減弱。
本文參考《發(fā)酵微生物學》一書。
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